दाग वाले बैक्टीरिया के फायदे

विषय

• बेहतर दृश्य
• पहचान और वर्गीकरण
• व्यवहार्यता का पता लगाना
• सेलुलर संरचनाओं की पहचान

सूक्ष्म जीवविज्ञानी सूक्ष्मजीवविज्ञानी जैसे कि शैवाल, प्रोटोजोआ, बैक्टीरिया, कवक और एक माइक्रोस्कोप का उपयोग करने वाले वायरस की विशेषताओं का अध्ययन करते हैं। जबकि कुछ जीवों जैसे प्रोटोजोआ और खमीर कोशिकाओं को गीला माउंट का उपयोग करके निरीक्षण करना आसान होता है, बैक्टीरिया कोशिकाओं को धुंधला होने की आवश्यकता होती है। वैज्ञानिकों ने बैक्टीरिया कोशिकाओं और सेलुलर संरचनाओं के बेहतर दृश्य के लिए कई तरीकों जैसे कि ग्राम धुंधला, एसिड-फास्ट धुंधला और फ्लोरोसेंट धुंधला विकसित किया। ऐसे धुंधला तरीकों का उपयोग करके, संरचनात्मक सुविधाओं की पहचान करना संभव है जो बैक्टीरिया को वर्गीकृत करने में मदद करते हैं।

बेहतर दृश्य

जीवाणु जीव इतने छोटे होते हैं कि उनमें से अधिकांश केवल एक खुर्दबीन के नीचे 1000X की आवर्धन शक्ति के साथ दिखाई देते हैं। हालांकि, आकार का मात्र बढ़ाना स्पष्टता की पर्याप्त डिग्री प्रदान नहीं करता है, ताकि दृश्य के लिए आवश्यक स्पष्टता प्रदान करने के लिए बैक्टीरिया को अवलोकन से पहले दाग दिया जाना चाहिए।

पहचान और वर्गीकरण

बैक्टीरिया प्रकार के बीच अंतर करने के लिए बैक्टीरिया को धुंधला करना अंतर धुंधला के रूप में जाना जाता है। ग्राम दाग एक ऐसा विभेदक दाग है जो बैक्टीरिया के बीच उनकी कोशिका भित्ति के आधार पर भिन्न होता है। इस विधि में, बैक्टीरियल कोशिकाएं वायलेट रंग लेने के लिए क्रिस्टल वायलेट के दाग के साथ प्रतिक्रिया करती हैं। डी-स्टेनिंग एजेंट जोड़ने पर, कुछ बैक्टीरिया कोशिकाएं रंग खो देती हैं, जबकि अन्य न। सफ़ारीन के दाग को जोड़ने पर, विघटित कोशिकाएँ लाल दिखने के लिए दाग़ लेती हैं जबकि जीवाणु कोशिकाएँ जो रंग नहीं खोती हैं, बैंगनी रहती हैं। लाल रंग को ग्रहण करने वाले जीवाणु कोशिकाओं को ग्राम नकारात्मक जीव कहा जाता है और जो रंग नहीं लेते हैं उन्हें ग्राम सकारात्मक जीव के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। ग्राम धुंधला संक्रमण में शामिल बैक्टीरिया की प्रारंभिक पहचान के लिए एक तीव्र विधि प्रदान करता है। इसी प्रकार, एसिड-फास्ट स्टेनिंग प्रक्रिया विशेष रूप से माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस जैसे माइकोबैक्टीरिया नामक बैक्टीरिया के वर्ग से संबंधित जीवों की पहचान करने में मदद करती है।

व्यवहार्यता का पता लगाना

जीवाणु संस्कृति के नमूनों में, जीवित बैक्टीरिया कोशिकाओं की उपस्थिति का पता लगाना अक्सर महत्वपूर्ण होता है। फ्लोरोसेंट स्टेंसिंग जैसी विधियाँ यह पहचानने में मदद करती हैं कि संस्कृति कोशिकाएँ व्यवहार्य हैं या नहीं। जीवित जीवाणुओं में 5-साइनो-2,3-डिटोलिल टेट्राजोलियम क्लोराइड (सीटीसी) दाग को डाई में बदलने की क्षमता होती है जो एक लाल प्रतिदीप्ति को दर्शाता है। इसलिए, जब सीटीसी के साथ दाग वाली संस्कृतियां ऐसे प्रतिदीप्ति का उत्सर्जन करती हैं, तो यह व्यवहार्य बैक्टीरिया की उपस्थिति को इंगित करता है। प्रोपीडियम आयोडाइड एक ऐसा दाग है जो केवल जीवित कोशिकाओं पर कार्य करता है जो क्षतिग्रस्त झिल्ली के पास होते हैं, और इसलिए, मृत बैक्टीरिया कोशिकाओं की पहचान करने में उपयोगी है।

सेलुलर संरचनाओं की पहचान

धुंधला कई सेलुलर संरचनाओं को स्पष्ट रूप से देखने की एक विधि प्रदान करता है। उदाहरण के लिए, फ्यूलजेन धुंधला विधि जीवाणु कोशिकाओं के भीतर नाभिक की पहचान करने की अनुमति देता है जबकि अल्बर्ट का दाग मेटैक्रोमैटिक कणिकाओं को देखने में उपयोगी है। इसी तरह, चांदी संसेचन तकनीक स्पिरोकैट्स की पहचान करने की अनुमति देती है। रयु के दाग के साथ दाग होने पर फ्लैगेल्ला का निरीक्षण करना आसान है। मैलाकाइट ग्रीन धुंधला बैक्टीरिया के बीजाणुओं की पहचान करने में मदद करता है।