एक एंजाइम एक प्रोटीन है जो उत्प्रेरित करता है (रासायनिक दर में वृद्धि)। अधिकांश एंजाइमों का इष्टतम तापमान, या वह तापमान जिस पर एंजाइमों की प्रतिक्रिया सबसे अच्छी होती है, 35 और 40 डिग्री सेल्सियस के बीच होती है। इस खिड़की के भीतर तापमान बढ़ने से प्रतिक्रिया की दर बढ़ जाती है, क्योंकि यह अणुओं को उत्तेजित करता है और उस दर को बढ़ाता है जिस पर एंजाइम / अभिकारक टकराते हैं और उत्पाद बनाने के लिए प्रतिक्रिया करते हैं। हालांकि, बढ़ते तापमान में बहुत अधिक एंजाइम की कमी हो सकती है और इसे बिल्कुल भी काम करने से रोक सकते हैं।
शिशु एंजाइम मात्रा द्वारा प्रतिक्रिया को गर्म करके और प्रतिक्रिया के छोटे नमूनों को लेते हुए इष्टतम एंजाइम तापमान का निर्धारण करें, यह निर्धारित करने के लिए कि उत्पादन उत्पाद की अधिकतम दर कब होती है।
एक विधि का चयन करें। निर्धारित करें कि आप प्रयोग में विभिन्न बिंदुओं पर अपने उत्पाद की एकाग्रता को कैसे मापने जा रहे हैं। उदाहरण के लिए, आप एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके कई उत्पादों की एकाग्रता को माप सकते हैं और अवशोषित से एकाग्रता की गणना कर सकते हैं, या प्रतिदीप्ति को मापकर और प्रतिदीप्ति से एकाग्रता की गणना कर सकते हैं।
अपना प्रयोग सेट करें। एक ढक्कन के साथ एक छोटे कंटेनर में अपने अभिकारकों और एंजाइम रखें, जैसे कि एक जगमगाहट शीशी। रिएक्शन शुरू होगा। कमरे के तापमान के पानी के एक बड़े बीकर में जगमगाहट शीशी रखें। एक हीटिंग प्लेट पर बीकर रखें। बीकर के अंदर एक थर्मामीटर रखें। यह आपको विभिन्न बिंदुओं पर प्रतिक्रिया के तापमान को मापने की अनुमति देता है।
कमरे के तापमान पर प्रतिक्रिया के बारे में 25 डिग्री सेल्सियस पर 100 माइक्रोलिटर नमूना लें। हीटिंग प्लेट को चालू करें। 30 और 40 डिग्री सेल्सियस (30.5, 31, 31.5, आदि) के बीच विभिन्न तापमानों पर आपकी प्रतिक्रिया के 100 माइक्रोलिटर नमूने लेते हैं।
प्रत्येक तापमान पर अपने उत्पाद की एकाग्रता का निर्धारण करें। जब तापमान 40 डिग्री सेल्सियस से ऊपर बढ़ जाता है, तो आपको उस दर में कमी दिखाई देगी जिस पर सब्सट्रेट को उत्पाद में परिवर्तित किया जाता है, क्योंकि एंजाइम का विकृतीकरण होता है। जिस बिंदु पर अधिकतम दर पर उत्पाद का उत्पादन किया जा रहा है वह वह बिंदु है जिस पर तापमान अपने इष्टतम पर है।