अमेरिकी पर्यावरण संरक्षण एजेंसी के अनुसार, LC50 को हवा या पानी में एक रसायन की सांद्रता के रूप में परिभाषित किया जाता है, जिससे उस हवा या पानी में रहने वाले 50 प्रतिशत परीक्षण जानवरों में मृत्यु का कारण बनता है। आमतौर पर चूहों या चूहों पर किए गए परीक्षणों के साथ, एलसी 50 के स्तर पर परीक्षण के 50 प्रतिशत जानवरों की एक एक्सपोज़र के बाद मृत्यु हो जाएगी। LC50 मान निर्धारित करने के लिए किए गए परीक्षण निर्दिष्ट करते हैं कि परीक्षण में किस जानवर का उपयोग किया जाता है। जबकि चूहों और चूहों पर विषाक्तता परीक्षण हमेशा लोगों तक नहीं पहुंचता है, LC50 मान महत्वपूर्ण है और इसका उपयोग सुरक्षित पक्ष पर किया जाता है जब मनुष्य सामग्री के आसपास काम करते हैं।
अपने परीक्षण मानकों को लिखें कि किस जानवर का परीक्षण किया जाएगा, प्रत्येक परीक्षण समूह में कितने जानवर हैं, रासायनिक की किस सांद्रता का परीक्षण किया जाएगा और जोखिम की लंबाई।
एक नियंत्रित प्रयोगशाला वातावरण में रासायनिक के एक एकाग्रता के लिए परीक्षण जानवरों के एक समूह को विषय। तब तक जारी रखें जब तक कि नियंत्रण समूह को छोड़कर सभी समूह, रासायनिक के प्रत्येक अलग-अलग एकाग्रता में से एक के अधीन न हों।
प्रति मिलियन (पीपीएम) भागों में, एलसी 50 को रासायनिक की सबसे कम सांद्रता के रूप में परिभाषित करें, जहां परीक्षण जानवरों की कम से कम 50 प्रतिशत मृत्यु हो जाती है।