यह बहुत पहले था कि आनुवंशिक इंजीनियरिंग विज्ञान कथाओं का सामान थी - एक जीव दूसरे की विशेषताओं के साथ विकसित होता है। 1970 के दशक से, हालांकि, आनुवंशिक हेरफेर तकनीक उस बिंदु पर आगे बढ़ी है जहां एक जीव में विदेशी डीएनए को फैलाना लगभग नियमित है। उदाहरण के लिए, कीट प्रतिरोध के लिए जीन को मकई में मिलाया जा सकता है, मानव इंसुलिन बनाने के लिए जीन को बैक्टीरिया में डाला जा सकता है और मानव कैंसर की नकल करने के लिए जीन को प्रयोगशाला चूहों में डाला जा सकता है। प्रक्रिया का विवरण एक संक्षिप्त लेख में वर्णन करने के लिए बहुत जटिल है, प्रत्येक चरण में कई विकल्प हैं, लेकिन चरणों के तार्किक अनुक्रम की वैचारिक रूपरेखा काफी सीधी है।
एक प्रतिबंध एंजाइम के साथ प्लास्मिड डीएनए और ब्याज के डीएनए सेते हैं। प्रतिबंध एंजाइम डीएनए ठिकानों के एक विशिष्ट अनुक्रम का पता लगाएगा और उस बिंदु पर डीएनए को काट देगा। प्रतिबंध एंजाइम वायरस के खिलाफ कुछ जीवाणु रक्षा तंत्र से प्राप्त होते हैं। थेरे के अणु जो डीएनए को स्निप करेंगे जहां वे आधारों के दिए गए पैटर्न का पता लगाते हैं।
डीएनए लिगेज के साथ कट-अलग प्लास्मिड और जीनोमिक डीएनए टुकड़े को सेते हैं। अधिकांश प्रतिबंध एंजाइमों के साथ, परिपत्र प्लास्मिड और जीनोमिक डीएनए टुकड़ों में पूरक "चिपचिपा सिरों" होंगे जो एक-दूसरे को पकड़ लेंगे। डीएनए लिगेज फिर टुकड़ों को एक साथ जोड़कर खत्म कर देगा। परिणाम परिपत्र प्लास्मिड का एक गुच्छा है जिसमें जीनोमिक डीएनए के अंश शामिल हैं।
संशोधित डीएनए के साथ लगाए गए जीवों की कॉलोनियों को विकसित करने के लिए बैक्टीरिया और संस्कृति में बैक्टीरिया में प्लास्मिड डालें। यदि आपके प्लास्मिड में एक एंटीबायोटिक-प्रतिरोधी जीन होता है, जिसमें मेजबान बैक्टीरिया की कमी होती है, तो आप एंटीबायोटिक-संक्रमित विकास माध्यम पर बैक्टीरिया की खेती करके सफलतापूर्वक संशोधित बैक्टीरिया के लिए स्क्रीन कर सकते हैं। बैक्टीरिया में प्लास्मिड्स को सम्मिलित करने के लिए कई तरीके हैं, जैसे कि एक microneedle का उपयोग करना, जीवाणु झिल्ली में छोटे छिद्रों को खोलने के लिए एक विद्युत क्षेत्र को लागू करना, या बस बैक्टीरिया और प्लास्मिड को एक ही समाधान में एक साथ रखना और बैक्टीरिया को अवशोषित करने देना। सहज रूप में।
संशोधित बैक्टीरिया के विभिन्न कालोनियों से नमूना कोशिकाओं। बैक्टीरिया झिल्ली को तोड़ने और डीएनए निकालने के लिए एक डिटर्जेंट समाधान के साथ नमूना कोशिकाओं को धो लें, फिर इसे गर्म करें या स्ट्रैड्स को अलग करने के लिए इसे सोडियम हाइड्रॉक्साइड से बाहर निकालें। यह विश्लेषण के लिए डीएनए के आधार अनुक्रम को उजागर करता है।
एक फ्लोरोसेंट जांच के साथ डीएनए सेते हैं। Incubated डीएनए पर एक पराबैंगनी प्रकाश चमक और प्रतिदीप्ति के लिए निरीक्षण करते हैं। जांच में डीएनए का एक छोटा अनुक्रम शामिल होता है, जो आपके द्वारा डाले गए जीनोमिक डीएनए से मेल खाता है। जहां जांच डीएनए youre के साथ मेल खाता है, यह प्रकाशित होने पर चमक जाएगा।
कॉलोनियों के जीवाणुओं को अलग करें जिनमे जीन आप सम्मिलित करना चाहते हैं। बैक्टीरियल कॉलोनियों को बढ़ने दे या तो अपने डीएनए को डुप्लिकेट करें, या डीएनए को निकालें जैसा कि आपने पहले किया था और इसे पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन मशीन में डुप्लिकेट किया था।