एचपीएलसी के बुनियादी घटक

विषय

• इंजेक्शन साइट
• पंप घटक
• कॉलम विवरण
• डिटेक्टर समारोह

उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी एक मिश्रण के प्रयोगशाला विश्लेषण के लिए एक तकनीक है। इसका एक कुशल प्रकार का क्रोमैटोग्राफी, जो एक स्तंभ के माध्यम से मिश्रण के नमूने का प्रसार करने के लिए, केवल गुरुत्वाकर्षण के बजाय उच्च दबाव का उपयोग करता है। एक नमूना इंजेक्ट किया जाता है, फिर एक पंप जिसमें उच्च मात्रा में दबाव होता है, नमूना को एक पैक कॉलम के साथ स्थानांतरित करने में मदद करता है, जहां इसे अलग-अलग घटकों में अलग किया जाता है। इस पृथक्करण का विश्लेषण एक डिटेक्टर द्वारा परिणाम प्राप्त करने के लिए किया जाता है।

इंजेक्शन साइट

एचपीएलसी में इंजेक्ट होने के लिए, एक नमूना को पहले एक ध्रुवीय तरल विलायक में भंग किया जाना चाहिए, अधिमानतः ज्ञात एचपीएलसी स्पेक्ट्रा के साथ एक ताकि इसका डेटा नमूनों से अलग किया जा सके। नमूने वाले तरल घोल को उपकरण में रखा जाता है और इसे स्तंभ में भेजा जाता है। इंजेक्शन साइट का वास्तविक स्थान उपकरणों के ब्रांड पर निर्भर करता है। ज्यादातर मामलों में, इंजेक्शन प्रक्रिया स्वचालित है, लेकिन कुछ मामलों में एक प्रयोगशाला कार्यकर्ता को एक छोटी सीरिंज सुई का उपयोग करके नमूना इंजेक्ट करना होगा।

पंप घटक

एचपीएलसी इकाई का पंप घटक आवश्यक है, क्योंकि यह दबाव प्रदान करता है जो स्तंभ के माध्यम से नमूना को प्रेरित करता है। पंप की ताकत बदलती है, लेकिन एक शक्तिशाली व्यक्ति 6,000 साई तक का दबाव या प्रति वर्ग इंच पाउंड का उत्पादन कर सकता है, जिसे नमूना इंजेक्ट किए जाने के बाद लागू किया जाता है। यह नमूने को केवल गुरुत्वाकर्षण के बल का उपयोग करके ड्रिप करने की तुलना में स्तंभ से अधिक तेज़ी और कुशलता से गुजरने की अनुमति देता है।

कॉलम विवरण

एक पंप द्वारा स्तंभ के माध्यम से पारित एक नमूना की बढ़ी हुई गति सरल तरल क्रोमैटोग्राफी में उपयोग किए गए लोगों की तुलना में एक अलग प्रकार के स्तंभ के उपयोग की अनुमति देती है। स्तंभ में पैकिंग सामग्री में बहुत छोटे कण आकार हो सकते हैं, जो सतह क्षेत्र को बढ़ाता है और इसलिए स्तंभ के साथ नमूने की बातचीत को सहायता करता है। अधिकांश एचपीएलसी कॉलम ध्रुवता के माध्यम से काम करते हैं। नमूना एक ध्रुवीय विलायक में भंग कर दिया जाता है, और स्तंभ मोटे तौर पर गैर-ध्रुवीय हाइड्रोकार्बन से बना होता है। नमूना अणु के ध्रुवीय भाग बहुत जल्दी स्तंभ से गुजरते हैं क्योंकि वे मुख्य रूप से विलायक के साथ बातचीत कर रहे हैं, जबकि नमूने गैर-ध्रुवीय घटक स्तंभ में भटकते हैं, स्तंभ घटकों के साथ कमजोर बातचीत करते हैं। इसलिए, नमूने घटक ध्रुवीय से अधिकांश गैर-ध्रुवीय तक के क्रम में स्तंभ से बाहर आते हैं।

डिटेक्टर समारोह

एचपीएलसी उपकरण के प्रकार के आधार पर डिटेक्टर भी भिन्न होते हैं। हालाँकि, अधिकांश कार्य उसी मूल तरीके से होते हैं। जैसे ही वे स्तंभ से बाहर आते हैं, अलग-अलग नमूना घटकों पर पराबैंगनी प्रकाश का एक स्रोत चमकता है। अधिकांश कार्बनिक यौगिक प्रकाश की एक निश्चित मात्रा को अवशोषित करते हैं, इसलिए जब वे लागू प्रकाश किरण से गुजरते हैं, तो एक डिटेक्टर उठा सकता है कि प्रकाश कितना अवशोषित होता है। डिटेक्टर उस घटक के प्रतिधारण समय को भी रिकॉर्ड करता है जिस क्रम में वे कॉलम से बाहर आते हैं। नमूनों के घटकों की सटीक प्रकृति का निर्धारण करने के लिए इस उत्पादन का विश्लेषण किया जा सकता है।