विषय
यद्यपि उन्हें नग्न आंखों से नहीं देखा जा सकता है, बैक्टीरिया हर जगह हैं। वे हमारे घरों के भीतर और हमारे शरीर में भोजन, मिट्टी, पानी, सतहों में मौजूद हैं। बैक्टीरिया आमतौर पर मिश्रित आबादी में मौजूद हैं। किसी दिए गए नमूने में अन्य जीवाणु प्रजातियों से एक विशिष्ट जीवाणु का अलगाव सूक्ष्मजीवविज्ञानी इसकी संरचना और कार्य, इसकी पहचान में उपयोग की जाने वाली विशेषताओं का अध्ययन करने की अनुमति देता है। माइक्रोबायोलॉजिस्ट अक्सर कई लकीर प्लेट तकनीकों में से एक का उपयोग करके बैक्टीरिया को अलग करते हैं।
उपकरण
सूक्ष्मजीवों को स्थानांतरित करने के लिए एक इनकोडिंग लूप का उपयोग किया जाता है। इसमें एक छोर पर एक छोटा, गोलाकार लूप के साथ एक निचे क्रोम या प्लैटिनम तार होता है। दूसरा छोर सीधा है और एक हैंडल में स्लाइड करता है। प्लास्टिक डिस्पोजेबल इनोक्युलेटिंग लूप भी उपलब्ध हैं। बैक्टीरिया को केवल तभी अलग किया जा सकता है जब वे बढ़ते हैं। माइक्रोबायोलॉजिस्ट उथले में स्ट्रीक प्लेट अलगाव के लिए बैक्टीरिया विकसित करते हैं, एक ठोस माध्यम से भरे हुए पेट्री डिश, जिसे अगर कहा जाता है। आगर उस वातावरण की नकल करता है जिसमें बैक्टीरिया स्वाभाविक रूप से बढ़ते हैं। मीडिया से भरे व्यंजन निष्फल हैं और अवांछित जीवों के विकास को रोकने के लिए लिडड किया जाता है। स्ट्रीक प्लेट अलगाव के दौरान, बूनसेन बर्नर की लौ में इनोक्युलेटिंग लूप को बार-बार निष्फल किया जाता है।
सिद्धांत
सूक्ष्म जीवाणुओं के मिश्रण वाले नमूने से विशिष्ट बैक्टीरिया को अलग करने के लिए स्ट्रीक प्लेट तकनीक सबसे लोकप्रिय तरीका है। तकनीक अनिवार्य रूप से जीवों की संख्या को कम करती है और उनके घनत्व को कम करती है। यह माइक्रोबायोलॉजिस्ट को अलग-अलग बैक्टीरियल कॉलोनियों को अलग करने और अलग करने की अनुमति देता है। एक कॉलोनी बैक्टीरिया का एक दृश्य क्लस्टर है। एक ही कॉलोनी में सभी बैक्टीरिया एक ही बैक्टीरिया सेल से उत्पन्न होते हैं। नतीजतन, अलग-अलग कॉलोनियाँ "शुद्ध" कालोनियाँ हैं। एक प्रकार के बैक्टीरिया से मिलकर शुद्ध संस्कृति का उत्पादन करने के लिए शुद्ध कॉलोनी को दूसरी प्लेट में स्थानांतरित किया जाता है।
प्रक्रिया
जब ठीक से किया जाता है, तो स्ट्रीक प्लेट आइसोलेशन एक नमूना निकालता है और अलग-अलग कालोनियों में अलग-अलग बैक्टीरियल कोशिकाओं को विकसित करने में सक्षम बनाता है। एक माइक्रोबायोलॉजिस्ट एक लौ में इनोक्युलेटिंग लूप को स्टरलाइज़ करके शुरू करता है। वह लूप को आगर से छूकर ठंडा करता है, फिर लूप को सैंपल में डुबोता है और प्लेट के एक हिस्से को कवर करने के लिए इसे आगे और पीछे फैलाता है। वह लूप को स्टरलाइज़ करती है, उसे ठंडा करती है, और कई बार पहले सेक्शन के माध्यम से लूप को खींचकर और ज़िगज़ैग मोशन का उपयोग करके दूसरे सेक्शन को कवर करके प्लेट के दूसरे, आसन्न सेक्शन को सम्मिलित करती है। यह पहले खंड से बैक्टीरिया की एक छोटी संख्या को उठाता है और उन्हें दूसरे खंड में स्थानांतरित करता है। इस बुनियादी प्रक्रिया को दोहराया जाने की संख्या का उपयोग की गई लकीर प्लेट विधि पर निर्भर करता है। विधि के बावजूद, मूल नमूने का उपयोग केवल प्लेट के पहले खंड को टीका लगाने के लिए किया जाता है।
स्ट्रीक प्लेट विधि
स्ट्रीक प्लेट की विधि अलग-अलग वर्गों की संख्या से भिन्न होती है। टी-लकीर विधि तीन खंडों का उपयोग करती है: ऊपरी आधे और दो समान रूप से नीचे के खंड। प्रारंभिक इनोकुलम को प्लेट के शीर्ष आधे हिस्से में रखा गया है। बैक्टीरिया को शीर्ष खंड से नीचे के एक खंड में खींचा जाता है, फिर उस निचले खंड से दूसरे खंड में। चतुर्भुज विधि में, चार समान आकार के खंड लकीर के फकीर होते हैं। लगातार चलने वाली विधि में आम तौर पर प्लेट के शीर्ष आधे भाग को सम्मिलित करना, इसे 180 डिग्री तक घुमाना, और प्लेट के दूसरे आधे भाग को लूप को निष्फल करना या पिछले अनुभाग से बैक्टीरिया को खींचना शामिल है।