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मिट्टी से बैक्टीरिया को अलग करना कई माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगों में एक महत्वपूर्ण पहला कदम है। एक बार जब वे अलग हो जाते हैं, तो बैक्टीरिया को चीजों को निर्धारित करने के लिए और अधिक विश्लेषण किया जा सकता है, जैसे कि उनकी प्रजातियों और मिट्टी के वातावरण में उनके कार्य। यहां तक कि मिट्टी की एक छोटी मात्रा में लाखों बैक्टीरिया हो सकते हैं, जो नमूना से बैक्टीरिया को अलग करने से पहले मिट्टी के नमूने को पतला करना आवश्यक बनाता है।
उपाय 100 मिली। स्नातक की उपाधि प्राप्त सिलेंडर में आसुत पानी और बाँझ बोतल में जोड़ें।
मिट्टी के नमूने का 1 ग्राम वजन करें और इसे आसुत जल की बोतल में जोड़ें।बोतल को कसकर कैप करें और घोल को अच्छी तरह मिलाने के लिए इसे हिलाएं।
बाँझ परीक्षण ट्यूबों को "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5," और "10 ^ -6" लेबल करें। विंदुक के उपयोग से प्रत्येक ट्यूब में 9 मिलीलीटर आसुत जल डालें।
एक नया पिपेट का उपयोग करके "10 ^ -3," लेबल वाली बोतल में समाधान के 1 मिलीलीटर को स्थानांतरित करें। ट्यूब को कैप करें और इसे धीरे से घुमाएं जब तक कि घोल अच्छी तरह से मिक्स न हो जाए।
एक नए विंदुक के साथ "10 ^ -3" टेस्ट ट्यूब में समाधान के 1 मिलीलीटर को "10 ^ -4" ट्यूब में स्थानांतरित करें। "10 ^ -4" ट्यूब कैप और मिश्रण करने के लिए घूमता है। इस विधि को "10 ^ -4" ट्यूब से "10 ^ -5" ट्यूब में और फिर "10 ^ -5" ट्यूब से "10 ^ -6" ट्यूब में समाधान स्थानांतरित करने के लिए दोहराएं।
प्लेट तीन नमूने "10 ^ -4," "10 ^ -5" और "10 ^ -6" ट्यूबों से प्रत्येक। पेट्री प्लेट में ट्यूब से 1 मिलीलीटर समाधान स्थानांतरित करने के लिए एक नया विंदुक का उपयोग करें। प्लेट में लगभग 15 मिलीलीटर पोषक तत्व अगर जोड़ें; फिर ढक्कन को प्लेट पर रखें और धीरे से घुमाएं ताकि आगर प्लेट के नीचे आ जाए।
एक नई विंदुक का उपयोग करके, पेट्री प्लेट में 1 मिलीलीटर आसुत जल डालकर एक नियंत्रण प्लेट बनाएं। अगर जोड़ें; ढक्कन लगाएं और प्लेट को घुमाएं।
पेट्री प्लेट्स को तब तक सीधा छोड़ दें जब तक कि आगर सेट न हो जाए। फिर प्लेटों को पलटें और उन्हें सेते हैं - या तो एक इनक्यूबेटर में या कमरे के तापमान पर - 24 घंटे तक और पांच दिनों तक।
ऊष्मायन समय की वांछित मात्रा के बाद इनक्यूबेटर से प्लेटें निकालें। लगभग 30 से 300 कॉलोनियों वाली प्लेटों पर जीवाणु कालोनियों की गणना करें। एक ही कालोनियों को चिह्नित करने के लिए एक स्थायी मार्कर का उपयोग करें जो आपने पहले ही गिना है ताकि एक ही कालोनियों को दो बार गिनने से बचें।
कमजोर पड़ने वाले कॉलोनियों की संख्या को विभाजित करें- "10 ^ -4," "10 ^ -5" या "10 ^ -6" - प्रत्येक प्लेट के लिए मिट्टी का घोल। प्रत्येक गणनीय प्लेट से परिणाम के औसत द्वारा मिट्टी के मूल ग्राम में खेती योग्य जीवाणुओं की संख्या का पता लगाएं।