क्रोमैटोग्राफी विज्ञान में एक प्रक्रिया है जिसका उपयोग मिश्रण को अलग करने के लिए किया जाता है। क्रोमैटोग्राफी का मूल सिद्धांत यह है कि विभिन्न आकारों के विभिन्न यौगिक अलग-अलग गति से बाधाओं से गुजरेंगे। उच्च दबाव तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) में, यौगिक को विभिन्न आकार के मोतियों के एक स्तंभ के माध्यम से इंजेक्ट किया जाता है। एक छोटा यौगिक एक बड़े यौगिक की तुलना में तेजी से स्तंभ से गुजरता है। कंपाउंड को कॉलम से गुजरने में जितना समय लगता है, वह रिटेंशन टाइम (RT) है। रिश्तेदार प्रतिधारण समय (आरआरटी) एक यौगिक के आरटी की तुलना दूसरे से होती है।
HPLC पर मुख्य चोटी का पता लगाएँ। मुख्य चोटी आउटपुट में सबसे बड़ी और सबसे प्रमुख चोटी होगी।
मुख्य चोटी के आरटी पढ़ें। यह देखकर पढ़ सकता है कि चोटी कब शुरू होती है और कब रुकती है। यदि चोटी 6.5 मिनट से शुरू होती है और 9.5 मिनट पर समाप्त होती है, तो आरटी 3 मिनट है।
रुचि के शिखर का पता लगाएँ। यह कोई भी चोटी हो सकती है जिसे आप आरआरटी की गणना करना चाहते हैं। उस चोटी के आरटी को पढ़ें। यदि चोटी 1 मिनट से शुरू होती है और 2.5 मिनट पर समाप्त होती है, तो आरटी 1.5 मिनट है।
ब्याज की चोटी के आरआरटी को खोजने के लिए मुख्य चोटी के आरटी द्वारा ब्याज के आरटी के आरटी को विभाजित करें। हमारे मामले में, यह 1.5 मिनट / 3 मिनट या 0.5 होगा।